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Molekulargewicht: 368,41 VE-821 ist ein potenter und selektiver ATP-kompetitiver Inhibitor von ATR mit Ki/IC50 von 13 nM/26 nM, zeigt Hemmung der H2AX-Phosphorylierung, minimale Aktivität gegen PIKKs ATM, DNA-PK, mTOR und PI3Kγ.
VE-821 zeigt eine ausgezeichnete Selektivität für ATR mit minimaler Kreuzreaktivität gegen die verwandten PIKKs ATM, DNA-PK, mTOR und PI3K (Kis von 16 μM, 2,2 μM, >1 μM und 3,9 μM. VE-821 allein führt zum Tode eines großen Teils der Krebszellpopulationen, aber es begrenzt nur reversibel die Zellzyklusprogression in normalen Zellen mit minimalem Tod oder langfristigen schädlichen Auswirkungen. VE-821 zusammen mit Cisplatin-Behandlung zeigt die stärkste Synergie VE-821 hemmt das H2AX-Zellwachstum mit IC50 von 800 nM.
Protokoll (nur als Referenz) Kinase-Assay: [2]
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Kinase inhibition
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The ability of compounds to inhibit ATR, ATM or DNAPK kinase activity istested using a radiometric-phosphate incorporation assay. A stock solution isprepared consisting of the appropriate buffer, kinase, and target peptide. To this isadded the compound of interest, at varying concentrations in DMSO to a final DMSO concentration of 7%. Assays are initiated by addition of an appropriate [γ-33P]ATP solution and incubated at 25 ℃. Assays are stopped, after the desired time course, by addition of phosphoric acid and ATP to a final concentration of 100 mM and 0.66μM, respectively. Peptides are captured on a phosphocellulose membrane, prepared as per manufacturer's instructions, and washed six times with 200 μL of 100 mM phosphoric acid, prior to the addition of 100 μL of scintillation cocktail and scintillation counting on a 1450 Microbeta Liquid Scintillation Counter. Dose−response data are analyzed using GraphPad Prism software
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Zellassay: [2]
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Cell lines
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H2AX cells
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Concentrations
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Incubation Time
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96 hours
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Method
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Cells are plated in 96-well plates and allowed to adhere overnight. The following day, compounds are added at the indicated concentrations in a final volume of 200μL, and the cells are then incubated for 96 h. MTS reagent (40μL) isthen added, and 1 h later, absorbance at 490 nm ismeasured using a SpectraMax Plus 384 plate reader. Synergy and antagonism are assessed using Macsynergy software.
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Umrechnung verschiedener Modelltiere basierend auf BSA (Wert basierend auf Daten aus FDA Draft Guidelines)
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Species
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Baboon
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Dog
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Monkey
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Rabbit
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Guinea pig
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Rat
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Hamster
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Mouse
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Weight (kg)
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12
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10
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3
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1.8
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0.4
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0.15
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0.08
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0.02
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Body Surface Area (m2)
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0.6
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0.5
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0.24
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0.15
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0.05
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0.025
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0.02
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0.007
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Km factor
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20
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20
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12
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12
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8
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6
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5
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3
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Animal A (mg/kg) = Animal B (mg/kg) multiplied by
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Animal B Km
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Animal A Km
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Um beispielsweise die Resveratrol-Dosis für eine Maus (22,4 mg/kg) auf eine Dosis basierend auf dem BSA für eine Ratte zu ändern, multiplizieren Sie 22,4 mg/kg mit dem Km-Faktor für eine Maus und dividieren Sie dann durch den Km-Faktor für eine Ratte. Diese Berechnung ergibt eine Ratten-Äquivalentdosis für Resveratrol von 11,2 mg/kg.
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Rat dose (mg/kg) = mouse dose (22.4 mg/kg) ×
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mouse Km(3)
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= 11.2 mg/kg
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rat Km(6)
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Chemische Informationen
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Molecular Weight (MW)
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368.41
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Formula
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C18H16N4O3S
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CAS No.
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1232410-49-9
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Storage
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3 years -20℃Powder
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6 months-80℃in solvent (DMSO, water, etc.)
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Synonyms
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Solubility (25°C) *
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In vitro
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DMSO
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74 mg/mL
(200.86 mM)
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Water
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<1 mg/mL
(
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Ethanol
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<1 mg/mL
(
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In vivo
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30% PEG400/0.5% Tween80/5% propylene glycol
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30 mg/mL
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* <1 mg/ml means slightly soluble or insoluble.
* Please note that Selleck tests the solubility of all compounds in-house, and the actual solubility may differ slightly from published values. This is normal and is due to slight batch-to-batch variations.
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Chemical Name
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2-Pyrazinecarboxamide, 3-amino-6-[4-(methylsulfonyl)phenyl]-N-phenyl-
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Molaritätsrechner Verdünnungsrechner Molekulargewichtsrechner
Produktgruppe : PI3K/Akt/mTOR > ATM/ATR-Inhibitor
