.cp_wz Tabelle {border-top: 1px solid #ccc;border-left:1px solid #ccc; } .cp_wz Tabelle td{border-right: 1px solid #ccc; Rahmen unten: 1px solid #ccc; Padding: 5px 0px 0px 5px;} .cp_wz table th {Rand-rechts: 1px Solid #ccc;Rand-Bottom: 1px Solid #ccc; Padding: 5px 0px 0px 5px;}
Molekulargewicht: 513,59 ZM 447439 ist ein selektiver und ATP-kompetitiver Inhibitor für Aurora A und Aurora B mit IC50 von 110 nM bzw. 130 nM. Es ist mehr als 8-fach selektiv für Aurora A/B als MEK1, Src, Lck und hat eine geringe Wirkung gegen CDK1/2/4, Plk1, Chk1 usw.
Biologische Aktivität In vitro hemmt ZM-447439 selektiv rekombinante humane Aurora A und B mit IC50-Werten von 110 bzw. 130 nM, während andere Proteinkinasen unterschiedlicher Strukturtypen einschließlich der mitotischen Kinasen CDK1 und PLK1 mit IC50-Werten >10 µM gehemmt werden. Aurora-Kinase-Inhibitor, ZM-447439 hemmt zeit- und dosisabhängig das Wachstum aller drei Zelllinien mit IC50-Werten von 3 μM (BON), 0,9 μM (QGP-1) und 3 μM (MIP-101) nach 72 Stunden kontinuierliche Belichtung. Darüber hinaus induziert ZM-447439 wirksam die Zellapoptose, indem es die DNA-Fragmentierung und die Aktivierung von Caspase 3 und 7 fördert, und stoppt GEP-NET-Zellen in der G0 /G1- und G2/M-Phase des Zellzyklus. Im Mausembryo führt die Hemmung der Aurora-Kinase-Aktivität durch ZM-447439 zu Anomalien während der Mitose, indem die Phosphorylierung von Histon H3 Serin 10 (H3S10Ph) von G2 in die Metaphase mit unterschiedlichen Störungen in jedem Embryonalzyklus reguliert wird. Eine kürzlich durchgeführte Studie zeigt, dass ZM-447439 eine wachstumshemmende und proapoptotische Wirkung auf SiHa-Zellen von Gebärmutterhalskrebs zeigt und die Chemosensitivität gegenüber Cisplatin erhöht.
|
In vitro kinase assays
|
Recombinant Aurora A and B are expressed as NH2-terminal His6-tagged fusion proteins using a baculovirus expression system. Aurora A is purified by affinity chromatography using Ni-NTA agarose, and Aurora B is purified by ion exchange chromatography using CM Sepharose Fast Flow. 1 ng purified recombinant enzyme is added to a reaction cocktail containing 25 mM Tris-HCl, pH 7.5, 12.5 mM KCl, 2.5 mM NaF, 0.6 mM DTT, 6.25 mM MnCl2, 10 μM peptide substrate, 10 μM for Aurora A or 5 μM ATP for Aurora B, and 0.2 μCi γ-[33P]ATP (specific activity ≥2,500 Ci/mmol), and is then incubated at RT for 60 minutes. Reactions are stopped by addition of 20% phosphoric acid, and the products are captured on P30 nitrocellulose filters and assayed for incorporation of 33P with a BetaplateTM counter. No enzyme and no compound control values are used to determine the concentration of ZM447439, which gave 50% inhibition of enzyme activity. Further details are available on request from Nicholas Keen.
|
|
Cell lines
|
BON, QGP-1 and MIP-101 cells
|
|
Concentrations
|
0-5 μM
|
|
Incubation Time
|
72 hours
|
|
Method
|
Cell number is evaluated by crystal violet staining. In brief, cells in 96-well plates are fixed with 1% glutaraldehyde. Then cells are stained with 0.1% crystal violet. The unbound dye is removed by washing with water. Bound crystal violet is solubilized with 0.2% Triton X-100. Light extinction which increases linearly with the cell number is analyzed at 570 nm using an ELISA reader.
|
Umrechnung verschiedener Modelltiere basierend auf BSA (Wert basierend auf Daten aus FDA Draft Guidelines)
|
Species
|
Baboon
|
Dog
|
Monkey
|
Rabbit
|
Guinea pig
|
Rat
|
Hamster
|
Mouse
|
|
Weight (kg)
|
12
|
10
|
3
|
1.8
|
0.4
|
0.15
|
0.08
|
0.02
|
|
Body Surface Area (m2)
|
0.6
|
0.5
|
0.24
|
0.15
|
0.05
|
0.025
|
0.02
|
0.007
|
|
Km factor
|
20
|
20
|
12
|
12
|
8
|
6
|
5
|
3
|
|
Animal A (mg/kg) = Animal B (mg/kg) multiplied by
|
Animal B Km
|
|
Animal A Km
|
Um beispielsweise die Resveratrol-Dosis für eine Maus (22,4 mg/kg) auf eine Dosis basierend auf dem BSA für eine Ratte zu ändern, multiplizieren Sie 22,4 mg/kg mit dem Km-Faktor für eine Maus und dividieren Sie dann durch den Km-Faktor für eine Ratte. Diese Berechnung ergibt eine Ratten-Äquivalentdosis für Resveratrol von 11,2 mg/kg.
|
Rat dose (mg/kg) = mouse dose (22.4 mg/kg) ×
|
mouse Km(3)
|
= 11.2 mg/kg
|
|
rat Km(6)
|
Chemische Informationen
|
Molecular Weight (MW)
|
513.59
|
|
Formula
|
C29H31N5O4
|
|
CAS No.
|
331771-20-1
|
|
Storage
|
3 years -20℃Powder
|
|
6 months-80℃in solvent (DMSO, water, etc.)
|
|
Synonyms
|
|
|
Solubility (25°C) *
|
In vitro
|
DMSO
|
103 mg/mL
(200.54 mM)
|
|
Water
|
<1 mg/mL
(
|
|
Ethanol
|
<1 mg/mL
(
|
|
In vivo
|
30% PEG400/0.5% Tween80/5% propylene glycol
|
30 mg/mL
|
* <1 mg/ml means slightly soluble or insoluble.
* Please note that Selleck tests the solubility of all compounds in-house, and the actual solubility may differ slightly from published values. This is normal and is due to slight batch-to-batch variations.
|
|
Chemical Name
|
N-(4-(6-methoxy-7-(3-morpholinopropoxy)quinazolin-4-ylamino)phenyl)benzamide
|
Molaritätsrechner Verdünnungsrechner Molekulargewichtsrechner
Produktgruppe : Epigenetik > Aurora-Kinase-Inhibitor
