.cp_wz Tabelle {border-top: 1px solid #ccc;border-left:1px solid #ccc; } .cp_wz Tabelle td{border-right: 1px solid #ccc; Rahmen unten: 1px solid #ccc; Padding: 5px 0px 0px 5px;} .cp_wz table th {Rand-rechts: 1px Solid #ccc;Rand-Bottom: 1px Solid #ccc; Polsterung: 5px 0px 0px 5px;}
Molekulargewicht:
447,51 Amuvatinib (MP-470) ist ein potenter und mehrfach zielgerichteter Inhibitor von c-Kit, PDGFRα und Flt3 mit IC50 von 10 nM, 40 nM und 81 nM, bzw. Phase 2.
Biologische Aktivität Das Hydrochloridsalz von MP-470 hemmt auch mehrere Mutanten von c-Kit, einschließlich c-KitD816V, c-KitD816H, c-KitV560G und c-KitV654A sowie eine Flt3-Mutante (Flt3D835Y) und zwei PDGFRα-Mutanten (PDGFRαV561D und PDGFRαD842V) mit IC50 von 10 nM bis 8,4 &mgr;M. MP-470 hemmt wirksam die Proliferation von OVCAR-3-, A549-, NCI-H647-, DMS-153- und DMS-114-Zellen mit einer IC50 von 0,9 μM–7,86 μM. MP-470 hemmt auch c-Kit und PDGFRα mit IC50-Werten von 31 µM bzw. 27 µM. MP-470 zeigt eine starke Zytotoxizität gegen MiaPaCa-2-, PANC-1- und GIST882-Zellen mit einer IC50 von 1,6 µM bis 3,0 µM. MP-470 bindet und hemmt auch mehrere c-Kit-Mutanten, einschließlich c-KitK642E, c-KitD816V und c-KitK642E/D816V. In MDA-MB-231-Zellen hemmt MP-470 (1 μM) die Tyrosin-Phosphorylierung von AXL. In LNCaP- und PC-3, aber nicht in DU145-Zellen zeigt MP-470 Zytotoxizität mit IC50 von 4 µM bzw. 8 µM und induziert Apoptose bei 10 µM. In LNCaP-Zellen löst MP-470 (10 μM) einen G1-Arrest aus und verringert die Phosphorylierung von Akt und ERK1/2. In SF767-Zellen hemmt MP-470 (10 μM) die c-Met-Phosphorylierung und sensibilisiert die Zellen gegenüber Strahlung. In Kombination mit Bestrahlung hemmt MP-470 (10 μM) die Aktivität der Glykogensynthasekinase (GSK)3β, induziert Apoptose und unterbricht die Reparatur von dsDNA-Brüchen wahrscheinlich durch Suppression von Rad51. In Xenotransplantatmodellen von Mäusen von HT-29-, A549- und SB-CL2-Zellen hemmt MP-470 (10 mg/kg–75 mg/kg über ip oder 50 mg/kg–200 mg/kg über po) das Tumorwachstum. Bei Mäusen mit LNCaP-Xenotransplantat induziert MP-470 (20 mg/kg) in Kombination mit Erlotinib signifikant die Hemmung des Tumorwachstums (TGI).
Kinase-Hemmtest von c-Kit und PDGFRα Zum Testen der inhibitorischen Aktivität gegen c-Kit und PDGFRα werden Enzyme mit unterschiedlichen Konzentrationen von MP-470 und radioaktiv markiertem γ-32P-ATP inkubiert. Nach 30 min werden die Reaktionsmischungen auf einem Acrylamidgel einer Elektrophorese unterzogen und die Autophosphorylierung, quantifiziert durch die Menge der in das Enzym eingebauten Radioaktivität, wird getestet. Methode Zellen werden mit einer Dichte von 2 × 103 bis 1 × 104 Zellen pro Well in 100 μL Medium am Tag 0 in 96-Well Falcon Mikrotiterplatten ausplattiert. An Tag 1 werden den Platten in vierfacher Ausführung zehn ul serielle Verdünnungen von MP-470 zugesetzt. Nach 4 Tagen Inkubation werden die Zellen mit 10 % Trichloressigsäure-Lösung fixiert. Anschließend werden sie mit 0,04 % Sulforhodamin B (SRB) in 1 % Essigsäure markiert. Nach mehrmaligem Waschen zur Entfernung des überschüssigen Farbstoffs werden 100 µl 50 mM Tris-Lösung in jede Vertiefung gegeben, um den Farbstoff aufzulösen. Die Extinktion jedes Wells wird auf einem Plattenlesegerät bei 570 nm abgelesen. Das Datum wird als Prozentsatz des Überlebens der Kontrolle ausgedrückt, berechnet aus der Extinktion, korrigiert um die Hintergrund-Extinktion. Der überlebende Prozentsatz der Zellen wird bestimmt, indem die mittleren Absorptionswerte des monoklonalen Antikörpers durch die mittleren Absorptionswerte der Kontrolle dividiert und mit 100 multipliziert werden.
Produktgruppe : Protein Tyrosinkinase > c-Kit-Inhibitor
