.cp_wz Tabelle {border-top: 1px solid #ccc;border-left:1px solid #ccc; } .cp_wz Tabelle td{border-right: 1px solid #ccc; Rahmen-unten: 1px solid #ccc; Padding: 5px 0px 0px 5px;} .cp_wz table th {Rand-rechts: 1px Solid #ccc;Rand-Bottom: 1px Solid #ccc; Padding: 5px 0px 0px 5px;}
Molekulargewicht:
547,04 Erastin ist ein Ferroptose-Aktivator, der auf mitochondriale VDAC einwirkt und Selektivität für Tumorzellen mit onkogenem RAS zeigt.
Biologische Aktivität Erastin ist selektiv tödlich für onkogenes RAS- mutierte Zelllinien und löst eine einzigartige eisenabhängige Form des nicht-apoptotischen Zelltods aus, die Ferroptose genannt wird. Erastin bindet direkt an VDAC2 und verursacht über die ROS-Produktion in Abhängigkeit von NADH eine mitochondriale Schädigung, was bei einigen Tumorzellen mit aktivierenden Mutationen im RAS-RAF-MEK-Signalweg den Zelltod induziert. Darüber hinaus verstärkt Erastin durch die Induktion von ROS-vermitteltem CID (Caspase-unabhängiger Zelltod) die Wirkung von Cisplatin in WT-EGFR-Zellen stark.
Methode BJ-TERT/LT/ST/RASV12-Zellen werden in 100 mm Schalen ausgesät und über Nacht wachsen gelassen. Die Zellen werden mit Erastin (5 oder 10 µg/ml) für 6, 8 oder 11 Stunden behandelt. Eine mit Camptothecin behandelte (0,4 ug/ml) Kontrolle wird gehalten, die zum Zeitpunkt der Aussaat 20 Stunden lang behandelt wird. Nach der Behandlung werden die Zellen mit Trypsin/EDTA geerntet und einmal mit frischem Serum enthaltendem Medium und dann zweimal mit phosphatgepufferter Kochsalzlösung gewaschen. Zellen werden in 1x Bindungspuffer resuspendiert. 100 µL werden mit 5 µL Annexin V-FITC und Propidium-Iodiode 15 min im Dunkeln bei Raumtemperatur inkubiert. Anschließend werden 400 µl des 1x Bindungspuffers zugegeben und die Zellen durchflusszytometrisch analysiert. Die Daten werden mit der Cellquest-Software erfasst und analysiert. Nur lebensfähige Zellen, die nicht mit Propidiumiodiode gefärbt werden, werden auf Annexin V-FITC-Färbung unter Verwendung des FL1-Kanals analysiert.
Produktgruppe : Stoffwechsel > Ferroptose-Hemmer
