.cp_wz Tabelle {border-top: 1px solid #ccc;border-left:1px solid #ccc; } .cp_wz Tabelle td{border-right: 1px solid #ccc; Rahmen unten: 1px solid #ccc; Padding: 5px 0px 0px 5px;} .cp_wz table th {Rand-rechts: 1px Solid #ccc;Rand-Bottom: 1px Solid #ccc; Polsterung: 5px 0px 0px 5px;} Flucytosin
Molekulargewicht: 129,09 Flucytosin (5-Fluorocytosin, 5-FC) ist ein Antimykotikum mit einer IC50 von 0,93 μM in C. albicans.
Biologische Aktivität Flucytosin hemmt das Wachstum von C. neoformans in Sabouraud-Dextrose-Brühe in Konzentrationen ≥ 1,25 mg/l und Flucytosin von 50 mg/l verursacht eine ~50%ige Reduktion der koloniebildenden Einheit (KBE)\ im J774.16 Abtötungsassay mit Lebensfähigkeit von J774.16 Zellen nicht beeinflusst durch Trypanblau-Ausschluss gemessen. Die Kombination von Flucytosin und monoklonalem IgGl-Antikörper gegen kapsuläres Glucuronoxylomannan von Cryptococcus neoformans ist bei der Verringerung der Anzahl der koloniebildenden Einheiten von C. Neoformans in vitro mit J774.16 murinen Makrophagen-ähnlichen Zellen wirksamer als jeder Wirkstoff allein. Die Wirksamkeit von Flucytosin (5FC) in Kombination mit Amphotericin B (AB) und Fluconazol (FCZ) wird gegen 35 Hefeisolate untersucht, von denen die 5FC-FCZ-Kombination gegen Candida-Spezies antagonistisch wirkt, bei einigen Candida-Isolaten jedoch Synergismus gefunden wird. Die Verabreichung von Flucytosin in Kombination mit dem monoklonalen Antikörper 2H1 an mit C. neoformans infizierte A/JCr-Mäuse reduziert signifikant die Lungen-, aber nicht die Hirn-Cfu, die wirksamer ist als jeder Wirkstoff allein. Die Kombination von intravenös verabreichtem Flucytosin in 0,9% Kochsalzlösung (NaCl) und Amphotericin B (AmB) bietet eine synergistische antimykotische Aktivität und ist mit einer geringeren Inzidenz von Nephrotoxizität verbunden als die alleinige Behandlung mit AmB. Die Infusion von Flucytosin (5-10 mg/kg/min), gelöst in 5% Glucose, in die Nierenarterie einer in situ perfundierten Niere für 15 Minuten erhöht den renalen Blutfluss (RBF) bei der Ratte, und die renale Vasodilatation hält für die Dauer an der Flucytosin-Infusion. Protokoll (nur als Referenz) Kinase-Assay: [1]
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Microdilution method
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The culture media used are RPMI 1640 with glutamine, without bicarbonate and phenol red, buffered with morpholinopropanesulfonic acid (MOPS) (0.165 M, pH 7.0). Two-fold serial dilutions of Flucytosine (0.06-64 μg/mL) are prepared and dispensed in 50 uL aliquot, in flat-bottom 96-well assay plates which are kept frozen at -70 °C in sealed plastic bags until used. The inoculum is prepared spectrophotometrically and standardized to a concentration of 1.0-5.0 × 103 cfu per mL. A 50 μL volume of this suspension is used to inoculate each well containing 50 μL of the double concentration of Flucytosine to be tested. Once inoculated, each well therefore contains 100 μL of broth favoured over 200 μL to facilitate the agitation of the plates prior to spectrophotometric reading. After an incubation period of 24 and 48 hours at 35 °C, the plates are agitated for 3 minutes at 900 r.p.m. with a shaker and the optical density of the growth in each well is determined with the use of an automatic plate reader set at 495 nm. The inhibitory concentration of IC50 is computed mathematically.
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Zellassay: [2]
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Cell lines
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J774.16 murine macrophage-like cell line
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Concentrations
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Dissolved in PBS, final concentration 50 mg/L
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Incubation Time
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24 hours
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Method
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J774.16 murine macrophage-like cells plated on 96-well tissue culture plates are incubated with 500 u/mL murine recombinant gamma-interferon overnight at 37 °C. The medium is then replaced with fresh medium containing gamma-interferon 500 μ/mL, LPS 3 mg/L, C. neoformans cells 1.6 × 104/well and Flucytosine 50 mg/L. Plates are incubated for 24 hours at 37 °C. Cell supernatants are collected and cells lysed by adding 0.1 mL sterile distilled water to each well, incubating at room temperature for 30 minutes, and then aspirating and ejecting the lysate with a pipette several times to complete cell disruption. Wells are rinsed with PBS (0.1 mL) and the cell supernatant, and lysate and rinse from each well are pooled, vortexed, diluted 1:50, vortexed again and spread on Sabouraud's dextrose agar for the cfu determination
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Umrechnung verschiedener Modelltiere basierend auf BSA (Wert basierend auf Daten aus FDA Draft Guidelines)
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Species
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Baboon
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Dog
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Monkey
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Rabbit
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Guinea pig
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Rat
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Hamster
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Mouse
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Weight (kg)
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12
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10
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3
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1.8
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0.4
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0.15
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0.08
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0.02
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Body Surface Area (m2)
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0.6
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0.5
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0.24
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0.15
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0.05
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0.025
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0.02
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0.007
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Km factor
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20
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20
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12
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12
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8
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6
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5
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3
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Animal A (mg/kg) = Animal B (mg/kg) multiplied by
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Animal B Km
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Animal A Km
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Um beispielsweise die Resveratrol-Dosis für eine Maus (22,4 mg/kg) auf eine Dosis basierend auf dem BSA für eine Ratte zu ändern, multiplizieren Sie 22,4 mg/kg mit dem Km-Faktor für eine Maus und dividieren Sie dann durch den Km-Faktor für eine Ratte. Diese Berechnung ergibt eine Ratten-Äquivalentdosis für Resveratrol von 11,2 mg/kg.
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Rat dose (mg/kg) = mouse dose (22.4 mg/kg) ×
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mouse Km(3)
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= 11.2 mg/kg
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rat Km(6)
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Chemische Informationen
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Molecular Weight (MW)
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129.09
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Formula
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C4H4FN3O
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CAS No.
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2022-85-7
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Storage
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3 years -20℃Powder
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6 months-80℃in solvent (DMSO, water, etc.)
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Synonyms
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Solubility (25°C) *
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In vitro
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DMSO
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8 mg/mL
(61.97 mM)
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Water
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5 mg/mL
(38.73 mM)
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Ethanol
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<1 mg/mL
(
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In vivo
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0.5% methylcellulose/0.2% Tween 80
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5 mg/mL
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Chemical Name
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6-amino-5-fluoro-2(1H)-pyrimidinone
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Stock Solution (1ml DMSO)
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1mM
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10mM
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20mM
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30mM
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Mass(mg)
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0.12909
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1.2909
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2.5818
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3.8727
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Produktgruppe : Andere > Sonstiges
