H 89 2HCl 130964-39-5

Molekulargewicht: 519,28 H 89 2HCl ist ein potenter PKA-Inhibitor mit Ki von 48 nM, 10-fach selektiv für PKA als PKG, mehr als 500-fache Selektivität als PKC, MLCK, Calmodulin-Kinase II und Casein-Kinase I/II.
Biologische Aktivität H89 2HCl ist ein potenter PKA (cAMP-abhängiger) Proteinkinase-A-Inhibitor mit Ki von 48 nM, zeigt 10-fache Selektivität gegenüber PKG, zeigt >500-fache Selektivität gegenüber PKC, MLCK, Calmodulin-Kinase II und Casein-Kinase I/ II. Eine Vorbehandlung der Zellen mit H-89 (30 µM) 1 h vor der Zugabe von Forskolin hemmt dosisabhängig die Forskolin-induzierte Proteinphosphorylierung deutlich. H89 hemmt auch mehrere andere Kinasen mit IC50 von 80, 120, 135, 270, 2600 und 2800 nM für S6K1, MSK1, PKA, ROCKII, PKBα bzw. MAPKAP-K1b. H89 hat auch Aktivität an einigen zellulären Rezeptoren und Ionenkanälen, einschließlich Kv1.3 K+ Kanälen, β1AR und β2AR. H89 verursacht deutliche Modifikationen der Proteinphosphorylierung, wobei die robustesten Änderungen in der Phosphorylierung Fructose-1,6-Biphosphatase, heterogenes nukleäres Ribonukleoprotein (hnRNP), NSFL1-Cofaktor p47 sind, die alle potenziell regulatorische Verbindungen zu cAMP/PKA haben. Protokoll (nur als Referenz) Kinase-Assay: [1]

PKA enzyme activity	cAMP-dependent protein kinase activity is assayed in a reaction mixture containing, in a final volume of 0.2 mL, 50 mM Tris-HC1 (pH 7.0), 10 mM magnesium acetate, 2 mM EGTA, 1 μM cAMP or absence of cAMP, 3.3-20 μM [γ-32P]ATP (4 × 105 cpm), 0.5 μg of the enzyme, 100 μg of histone H2B, and each compound, as indicated.

Zellassay: [1]

Cell lines	PC12D
Concentrations	~30 μM
Incubation Time	1 h
Method	Levels of intracellular cAMP are determined. After 48 h in culture, PC12D cells are cultured in test medium containing 30 μM H-89 for 1 h and then exposed to fresh medium that contained both 10 μM forskolin and 30 μM H-89. Cells are scraped off with a rubber policeman and sonicated in the presence of 0.5 ml of 6% trichloroacetic acid. To extract trichloroacetic acid, 2 ml of petroleum ether is added, the preparation mixed and centrifuged at 3000 rpm for 10 min. After aspiration of the upper layer, the residue sample solution is used for determination.

Tierstudie: [5] [6]

Animal Models	rat; mice
Formulation	Dissolved in 100% DMSO, diluted 1:20 in 0.9% sterile saline (Rat); 1% DMSO (Mice)
Dosages	20 or 200 mg/kg (Rat); 0-5 mg/kg (Mice)
Administration	s.c. (Rat); i.p. (Mice)
Solubility	1% DMSO/30% polyethylene glycol/1% Tween 80, 30 mg/mL
* Please note that Selleck tests the solubility of all compounds in-house, and the actual solubility may differ slightly from published values. This is normal and is due to slight batch-to-batch variations.

Umrechnung verschiedener Modelltiere basierend auf BSA (Wert basierend auf Daten aus FDA Draft Guidelines)

Species	Baboon	Dog	Monkey	Rabbit	Guinea pig	Rat	Hamster	Mouse
Weight (kg)	12	10	3	1.8	0.4	0.15	0.08	0.02
Body Surface Area (m2)	0.6	0.5	0.24	0.15	0.05	0.025	0.02	0.007
Km factor	20	20	12	12	8	6	5	3

Animal A (mg/kg) = Animal B (mg/kg) multiplied by	Animal B Km
	Animal A Km

Um beispielsweise die Resveratrol-Dosis für eine Maus (22,4 mg/kg) auf eine Dosis basierend auf dem BSA für eine Ratte zu ändern, multiplizieren Sie 22,4 mg/kg mit dem Km-Faktor für eine Maus und dividieren Sie dann durch den Km-Faktor für eine Ratte. Diese Berechnung ergibt eine Ratten-Äquivalentdosis für Resveratrol von 11,2 mg/kg.

Rat dose (mg/kg) = mouse dose (22.4 mg/kg) ×	mouse Km(3)	= 11.2 mg/kg
	rat Km(6)

Chemische Informationen

Molecular Weight (MW)	519.28
Formula	C20H20BrN3O2S.2HCl
CAS No.	130964-39-5

Storage	3 years -20℃Powder
	6 months-80℃in solvent (DMSO, water, etc.)
Synonyms

Solubility (25°C) *	In vitro	DMSO	104 mg/mL (200.27 mM)
		Water	6 mg/mL (11.55 mM)
		Ethanol	<1 mg/mL (
	In vivo	1% DMSO/30% polyethylene glycol/1% Tween 80	30 mg/mL

Chemical Name	(E)-N-(2-(4-bromocinnamylamino)ethyl)isoquinoline-5-sulfonamide dihydrochloride

Molaritätsrechner Verdünnungsrechner Molekulargewichtsrechner

Produktgruppe : Andere > PKA-Inhibitor