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Molekulargewicht:
418,37 GNF-5 ist ein selektiver und allosterischer Bcr-Abl-Inhibitor mit einer IC50 von 220 nM.
Biologische Aktivität GNF-5 unterdrückt in Kombination mit Imatinib oder Nilotinib das Auftreten von Resistenzmutationen in vitro und zeigt eine additive inhibitorische Aktivität in biochemischen und zellulären Assays gegen die Bcr-Abl T315I-Mutante. GNF-5 zeigt eine starke antiproliferative Aktivität mit EC50 von 430 nM und 580 nM gegen wt-Bcr-Abl bzw. E255K mutierte Bcr-Abl transformierte Zellen. GNF-5 (100 mg/kg) zeigt Wirksamkeit auf Wildtyp- und T315I-Bcr-Abl-abhängige Proliferation in Xenotransplantat- und Knochenmarktransplantationsmodellen. Darüber hinaus führt eine Kombination von GNF-5 (75 mg/kg) mit Nilotinib (50 mg/kg) zu einem verbesserten Gesamtüberleben in einem T315I Bcr-Abl BMT-Modell. Protokoll (nur als Referenz) Kinase-Assay: [1]
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Kinetic characterization of Abl inhibition
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The ATP/NADH-coupled assay system in a 96-well format is used to determine the initial velocity of Abl tyrosine kinase catalyzed peptide phosphorylation. The reaction mixture contained 20 mM Tris-HCl, (pH 8.0), 50 mM NaCl, 10 mM MgCl2, 2 mM PEP [2-(Phosphonooxy)- 2-propenoic acid) and 20 μg Abl peptide substrate (EAIYAAPFAKKK), fixed or varied (to determine inhibitor kinetic parameters) concentration of inhibitor applied, 1/50 of the final reaction mixture volume of PK/LDH enzyme (pyruvate kinase/lactic dehydrogenase enzymes from rabbit muscle), 160 μM NADH, 0.16 μM Abl, and ATP added last to start the reaction. Absorbance data are collected every 20s at 340 nm using a SpectraMax M5 Microplate Reader.
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Zellassay: [2]
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Cell lines
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Ba/F3.p210 cells
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Concentrations
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~10 μM
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Incubation Time
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48 hours
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Method
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Ba/F3.p210 cells are obtained by transfecting the IL-3-dependent murine hematopoietic Ba/F3 cell line with a pEYK vector containing p210BCR-ABL and Bcr-Abl mutations. All cell lines are cultured with 5% CO2 at 37 °C in RPMI 1640 with 10% fetal bovine serum (FBS) and supplemented with 1% l-glutamine. Parental Ba/F3 cells are similarly cultured with 10% WEHI-conditioned medium as a source of IL-3. Transfected cell lines are cultured in media supplemented with 25 μg/mL zeocin. The 48 h cell proliferation studies are obtained using the CellTiter-Glo assay.
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Tierstudie: [1]
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Animal Models
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Ba/F3.p210 xenograft mouse model
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Formulation
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PEG400/saline, 1:1
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Dosages
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~100 mg/kg bid
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Administration
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p.o.
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Umrechnung verschiedener Modelltiere basierend auf BSA (Wert basierend auf Daten aus FDA Draft Guidelines)
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Species
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Baboon
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Dog
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Monkey
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Rabbit
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Guinea pig
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Rat
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Hamster
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Mouse
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Weight (kg)
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12
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10
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3
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1.8
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0.4
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0.15
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0.08
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0.02
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Body Surface Area (m2)
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0.6
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0.5
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0.24
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0.15
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0.05
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0.025
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0.02
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0.007
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Km factor
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20
|
20
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12
|
12
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8
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6
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5
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3
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Animal A (mg/kg) = Animal B (mg/kg) multiplied by
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Animal B Km
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Animal A Km
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Um beispielsweise die Resveratrol-Dosis für eine Maus (22,4 mg/kg) auf eine Dosis basierend auf dem BSA für eine Ratte zu ändern, multiplizieren Sie 22,4 mg/kg mit dem Km-Faktor für eine Maus und dividieren Sie dann durch den Km-Faktor für eine Ratte. Diese Berechnung ergibt eine Ratten-Äquivalentdosis für Resveratrol von 11,2 mg/kg.
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Rat dose (mg/kg) = mouse dose (22.4 mg/kg) ×
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mouse Km(3)
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= 11.2 mg/kg
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rat Km(6)
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Chemische Informationen
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Molecular Weight (MW)
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418.37
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Formula
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C20H17F3N4O3
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CAS No.
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778277-15-9
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Storage
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3 years -20℃Powder
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6 months-80℃in solvent (DMSO, water, etc.)
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Synonyms
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N/A
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Solubility (25°C) *
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In vitro
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DMSO
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83 mg/mL
(198.38 mM)
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Water
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<1 mg/mL
(
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Ethanol
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20 mg/mL
heating
(47.8 mM)
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* <1 mg/ml means slightly soluble or insoluble.
* Please note that Selleck tests the solubility of all compounds in-house, and the actual solubility may differ slightly from published values. This is normal and is due to slight batch-to-batch variations.
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Chemical Name
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N-(2-Hydroxyethyl)-3-[6-[[4-(trifluoromethoxy)phenyl]amino]-4-pyrimidinyl]benzamide
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Molaritätsrechner Verdünnungsrechner Molekulargewichtsrechner
Produktgruppe : Angiogenese > Src-Inhibitor
