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Molekulargewicht:
285,23 Fludarabin ist ein STAT1-Aktivierungsinhibitor und ein DNA-Synthesehemmer.
Biologische Aktivität Fludarabin hemmt effizient die Proliferation von RPMI 8226-Zellen mit einer IC50 von 1,54 µg/ml. Die IC50 von Fludarabin gegen MM.1S- und MM.1R-Zellen beträgt 13,48 µg/ml bzw. 33,79 µg/ml. Im Gegensatz dazu sind U266-Zellen resistent gegen Fludarabin mit einer IC50 von 222,2 µg/ml. Die Behandlung mit Fludarabin führt zu einer erhöhten Zellzahl in der G1-Phase des Zellzyklus, begleitet von einer gleichzeitigen Reduktion der Zellen in der S-Phase des Zellzyklus in zeitabhängiger Weise. Fludarabin induziert eine Blockade des Zellzyklus und löst die Apoptose in MM-Zellen aus. Fludarabin löst eine zeitabhängige Spaltung von Caspase-8, -9 und -3, -7 aus, gefolgt von PARP-Spaltung. Fludarabin erhöht die Expression von Bax zeitabhängig, während sich die Expression von Bak nicht ändert. Nach 12-stündiger Exposition gegenüber Fludarabin zeigen RPMI 8226-Zellen einen Verlust des Membranpotentials, wobei 61,05 % der Zellen eine geringe Fluoreszenz von Rhodamin 123 exprimieren, verglichen mit 8,62 % der Zellen in der unbehandelten Kontrolle. Zur Verbesserung der Löslichkeit wird Fludarabin als Monophosphat (F-ara-AMP, Fudarabin) formuliert, das bei intravenöser Infusion augenblicklich und quantitativ zum Mutternukleosid dephosphoryliert wird. Innerhalb der Zellen findet eine Rephosphorylierung statt, die zu Fuoroadeninarabinosidtriphosphat (F-ara-ATP) führt, dem wichtigsten zytotoxischen Metaboliten von F-ara-A. Fludarabin kann auch eine proinflammatorische Stimulation von Monozytenzellen induzieren, wie durch eine erhöhte Expression der ICAM-1- und IL-8-Freisetzung untersucht wird. Fludarabin beeinflusst das Wachstum von Eierstockkrebszelllinien nicht, während es bei Melanomzelllinien eine deutliche und dosisabhängige Hemmung der Proliferation induziert. Fludarabin induziert eine signifikante Verringerung der STAT-1-Phosphorylierung, während es die JAK2-Aktivierung nicht verändert. Interessanterweise beeinflusst Fludarabin die Phosphorylierung dieser drei STAT-Proteine nicht signifikant. Fludarabin (1,5 mg) verhindert signifikant die STAT-1-Phosphorylierung und reduziert auch die erhöhte Menge dieses Proteins. Bei der JAK2-Phosphorylierung werden nach 2 Tagen keine signifikanten Veränderungen gezeigt, aber Fludarabin hemmt die JAK2-erhöhte Expression nach 7 Tagen. Fludarabin hemmt spezifisch die STAT-1-Aktivierung, ohne andere STAT-Proteine zu beeinflussen, und verringert folglich die VSMC-Proliferation. Mit PBS behandelte Tumore wachsen schnell auf ungefähr das 10-fache ihres anfänglichen Volumens in 25 Tagen, wohingegen die Tumoren in Fludarabin bei 40 mg/kg weniger als das 5-fache zunehmen. Es wird eine signifikante Antitumorwirkung von 40 mg/kg Fludarabin auf das RPMI8226-Tumorwachstum gezeigt. RPMI8226-Tumoren, die am Tag 10 mit 40 mg/kg Fludarabin behandelt wurden, erhöhen die apoptotischen Kerne. Fludarabin ist wirksam bei der Unterdrückung von RPMI8226-Myelom-Xenotransplantaten bei SCID-Mäusen. Protokoll (nur als Referenz) Zellassay: [1]
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Cell lines
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Dexamethasone-sensitive (MM.1S) and -resistant (MM.1R) human MM cell lines, RPMI8226 and U266 cell lines
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Concentrations
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2 μg/mL
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Incubation Time
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24 hours
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Method
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After treated with Fludarabine or control, dexamethasone-sensitive (MM.1S) and -resistant (MM.1R) human MM cell lines, RPMI8226 and U266 cell lines (5 × 105 cells) are washed twice in phosphate-buffered saline (PBS) and fixed with 70% ice-cold ethanol, then centrifuged and suspended in PBS containing 100 μg/mL RNase A. After incubated for 30 minutes at 37 ºC, samples are resuspended in 25 μg/mL propidium iodide. Flow cytometry is performed on a FACSCalibur automated system. Apoptosis is determined by Annexin V-FITC apoptosis detection kit, according to the manufacturer's instructions. For TUNEL (terminal deoxynucleotidyl transferase-mediated deoxyuridine triphosphate nick end labeling) assay, cells are analyzed by flow cytometry using the in situ cell death detection kit.
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Tierstudie: [1]
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Animal Models
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Severe combined immunodeficient (SCID) mice bearing RPMI 8226 cells
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Formulation
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PBS
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Dosages
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40 mg/kg
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Administration
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Administered via i.p.
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Solubility
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30% propylene glycol, 5% Tween 80, 65% D5W,
30 mg/mL
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* Please note that Selleck tests the solubility of all compounds in-house, and the actual solubility may differ slightly from published values. This is normal and is due to slight batch-to-batch variations.
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Umrechnung verschiedener Modelltiere basierend auf BSA (Wert basierend auf Daten aus FDA Draft Guidelines)
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Species
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Baboon
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Dog
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Monkey
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Rabbit
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Guinea pig
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Rat
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Hamster
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Mouse
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Weight (kg)
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12
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10
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3
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1.8
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0.4
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0.15
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0.08
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0.02
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Body Surface Area (m2)
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0.6
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0.5
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0.24
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0.15
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0.05
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0.025
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0.02
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0.007
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Km factor
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20
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20
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12
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12
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8
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6
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5
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3
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Animal A (mg/kg) = Animal B (mg/kg) multiplied by
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Animal B Km
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Animal A Km
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Um beispielsweise die Resveratrol-Dosis für eine Maus (22,4 mg/kg) auf eine Dosis basierend auf dem BSA für eine Ratte zu ändern, multiplizieren Sie 22,4 mg/kg mit dem Km-Faktor für eine Maus und dividieren Sie dann durch den Km-Faktor für eine Ratte. Diese Berechnung ergibt eine Ratten-Äquivalentdosis für Resveratrol von 11,2 mg/kg.
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Rat dose (mg/kg) = mouse dose (22.4 mg/kg) ×
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mouse Km(3)
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= 11.2 mg/kg
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rat Km(6)
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Chemische Informationen
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Molecular Weight (MW)
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285.23
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Formula
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C10H12FN5O4
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CAS No.
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21679-14-1
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Storage
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3 years -20℃Powder
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6 months-80℃in solvent (DMSO, water, etc.)
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Synonyms
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FaraA, Fludarabinum
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Solubility (25°C) *
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In vitro
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DMSO
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57 mg/mL
(199.83 mM)
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Water
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<1 mg/mL
(
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Ethanol
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<1 mg/mL
(
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In vivo
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30% propylene glycol, 5% Tween 80, 65% D5W
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30 mg/mL
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* <1 mg/ml means slightly soluble or insoluble.
* Please note that Selleck tests the solubility of all compounds in-house, and the actual solubility may differ slightly from published values. This is normal and is due to slight batch-to-batch variations.
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Chemical Name
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(2R,3S,4S,5R)-2-(6-amino-2-fluoro-9H-purin-9-yl)-5-(hydroxymethyl)-tetrahydrofuran-3,4-diol
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Molaritätsrechner Verdünnungsrechner Molekulargewichtsrechner
Produktgruppe : JAK/STAT > STAT-Hemmer
