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Molekulargewicht:
573,7 TW-37 ist ein neuartiger nichtpeptidischer Inhibitor gegen rekombinantes Bcl-2, Bcl-xL und Mcl-1 mit einem Ki von 0,29 µM, 1,11 µM bzw. 0,26 µM .
Biologische Aktivität TW-37 zielt auf die BH3-Bindungsfurche in Bcl-2 ab, wo proapoptotische Bcl-2-Proteine binden, und zeigt eine höhere Affinität und Selektivität für Bcl-2 und Mcl-1 gegenüber Bcl-xL mit Ki-Werten von 0,29 μM , 0,26 µM bzw. 1,11 µM. In vitro zeigt TW-37 eine signifikante antiproliferative und pro-apoptotische Wirkung in einer de novo chemoresistenten WSU-DLCL2-Lymphomzelllinie und primären Zellen, die von einem Lymphompatienten ohne Wirkung auf normale periphere Blutlymphozyten erhalten wurden. TW-37 zeigt die hemmende Wirkung sowohl auf das Zellwachstum als auch auf den Zelltod in Endothelzellen mit einer IC50 von ungefähr 1,8 &mgr;M ohne Wirkung auf die Fibroblasten, die dem gleichen Konzentrationsbereich wie die Endothelzellen ausgesetzt waren. Darüber hinaus zeigt TW37 auch die Antiproliferationswirkung in MCF-7-, LNCaP- und SLK-Tumorzelllinien mit dem gleichen oder einem niedrigeren Konzentrationsbereich als denjenigen, die zur Hemmung des Endothelzellwachstums erforderlich sind. TW-37 zeigt bei alleiniger Gabe eine maximal tolerierte Dosis (MTD) von 40 mg/kg für drei iv Injektionen bei Mäusen mit schwerer kombinierter Immunschwäche (SCID) und verstärkt die tumorhemmende Wirkung der Cyclophosphamid-Doxorubicin-Vincristin-Prednison (CHOP)-Therapie. TW-37, verabreicht durch iv, erzeugt die antiangiogene Wirkung, indem es die Dichte der funktionellen menschlichen Mikrogefäße in dem schweren kombinierten immundefizienten Mausmodell der menschlichen Angiogenese verringert. Die Kombination von TW-37 und MEK-Inhibitoren blockiert das Melanomzellwachstum bei Mäusen synergistisch durch eine signifikante Reduzierung des Tumorvolumens und der Tumormasse. Protokoll (nur als Referenz) Kinase-Assay: [1]
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Fluorescence polarization-based binding assay for recombinant Bcl-2, Bcl-XL, and Mcl-1 protein
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For this assay, the 21-residue BH3 peptide QEDIIRNIARHLAQVGDSMDR derived from Bid labeled with 6-carboxyfluorescein succinimidyl ester (FAM-Bid) and recombinant proteins derived from human Bcl-2,Bcl-X L,and Mcl-1 are employed. It is determined that FAM-Bid has a Ki of 11 nM to Bcl-2 protein,25 nM to Bcl-XL protein,and 5.7 nM to Mcl-1 protein. The competitive binding assay for Bcl-XL is same as that for Bcl-2 with the following exceptions: 30 nM Bcl-XL protein and 2.5 nM FAM-Bid peptide in the following assay buffer [50 mM Tris-Bis (pH 7.4) and 0.01% bovine gamma-globulin].
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Zellassay: [2]
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Cell lines
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HDMECs
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Concentrations
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0 - 100 μM
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Incubation Time
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96 hours
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Method
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The sulforhodamine B (SRB) cytotoxicity assay is used as described. Briefly, optimal cell density for cytotoxicity assay is determined by growth curve analysis. HDMECs are seeded in a 96-well plate and allowed to adhere overnight. Drug or control is diluted in EGM2-MV and layered onto cells, which are allowed to incubate for times as indicated in the figures. Alternatively, HDMECs are coincubated with TW37 and 0 to 100 ng/mL recombinant human VEGF (rhVEGF)165 or 0 to 100 ng/mL recombinant human CXCL8. Cells are fixed on the plates by addition of cold trichloroacetic acid (10% final concentration) and incubation for 1 hour at 4 °C. Cellular protein is stained by addition of 0.4% SRB in 1% acetic acid and incubation at room temperature for 30 minutes. Unbound SRB is removed by washing with 1% acetic acid and the plates are air dried. Bound SRB is resolubilized in 10 mM unbuffered Tris-base and absorbance is determined on a microplate reader at 560 nm. Test results are normalized against initial plating density and drug-free controls. Data are obtained from triplicate wells per condition and are representative of at least three independent experiments
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Tierstudie: [3]
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Animal Models
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Athymic NCr-nu/nu mice bearing SK-Mel-147 melanoma xenografts
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Formulation
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TW-37 is resuspended in 1:1 Tween 80/ethanol (diluted 10-fold in 0.9% saline before use).
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Dosages
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~40 mg/kg
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Administration
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Administered via i.v. or i.p.
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Solubility
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30% propylene glycol, 5% Tween 80, 65% D5W,
30 mg/mL
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* Please note that Selleck tests the solubility of all compounds in-house, and the actual solubility may differ slightly from published values. This is normal and is due to slight batch-to-batch variations.
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Umrechnung verschiedener Modelltiere basierend auf BSA (Wert basierend auf Daten aus FDA Draft Guidelines)
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Species
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Baboon
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Dog
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Monkey
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Rabbit
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Guinea pig
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Rat
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Hamster
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Mouse
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Weight (kg)
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12
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10
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3
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1.8
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0.4
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0.15
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0.08
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0.02
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Body Surface Area (m2)
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0.6
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0.5
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0.24
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0.15
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0.05
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0.025
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0.02
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0.007
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Km factor
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20
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20
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12
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12
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8
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6
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5
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3
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Animal A (mg/kg) = Animal B (mg/kg) multiplied by
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Animal B Km
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Animal A Km
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Um beispielsweise die Resveratrol-Dosis für eine Maus (22,4 mg/kg) auf eine Dosis basierend auf dem BSA für eine Ratte zu ändern, multiplizieren Sie 22,4 mg/kg mit dem Km-Faktor für eine Maus und dividieren Sie dann durch den Km-Faktor für eine Ratte. Diese Berechnung ergibt eine Ratten-Äquivalentdosis für Resveratrol von 11,2 mg/kg.
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Rat dose (mg/kg) = mouse dose (22.4 mg/kg) ×
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mouse Km(3)
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= 11.2 mg/kg
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rat Km(6)
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Chemische Informationen
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Molecular Weight (MW)
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573.7
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Formula
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C33H35NO6S
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CAS No.
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877877-35-5
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Storage
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3 years -20℃Powder
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6 months-80℃in solvent (DMSO, water, etc.)
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Synonyms
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Solubility (25°C) *
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In vitro
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DMSO
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115 mg/mL
(200.45 mM)
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Water
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<1 mg/mL
(
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Ethanol
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4 mg/mL
(6.97 mM)
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In vivo
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30% propylene glycol, 5% Tween 80, 65% D5W
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30 mg/mL
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* <1 mg/ml means slightly soluble or insoluble.
* Please note that Selleck tests the solubility of all compounds in-house, and the actual solubility may differ slightly from published values. This is normal and is due to slight batch-to-batch variations.
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Chemical Name
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5-(2-isopropylbenzyl)-N-(4-(2-tert-butylphenylsulfonyl)phenyl)-2,3,4-trihydroxybenzamide
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Molaritätsrechner Verdünnungsrechner Molekulargewichtsrechner
Produktgruppe : Apoptose > Bcl-2-Inhibitor
